استكشاف الأخطاء وإصلاحها في المشكلات الشائعة في تقسيم المشراح الدوار

يقوم الميكروتوم الدوار بتحويل كتلة البارافين إلى أقسام رفيعة وموحدة مجهر يمكن أن تكشف في الواقع. عندما يحدث خطأ في عملية التقسيم، نادرًا ما يكون الخطأ هو الأداة وحدها: عادةً ما يكون الخطأ هو سلسلة التثبيت والمعالجة والتضمين والعناية بالشفرة وإعداد الآلة. يستعرض هذا الدليل مشاكل الميكروتوم الدوار الأكثر شيوعًا، وسبب حدوثها، والإصلاحات التي تساعد على إعادة شرائط نظيفة إلى الحمام المائي. إنه مكتوب لمختبرات الأنسجة وعلم الأمراض والتدريس التي تحتاج إلى نتائج قابلة للتكرار دون تخمين.

يتم تحديد جودة القسم قبل القطع الأول

يتم خبز معظم عيوب التقسيم أثناء تحضير الأنسجة. إذا كانت الكتلة غير معالجة، أو تمت معالجتها بشكل مفرط أو سيئة التوجيه، فلن يؤدي أي قدر من تعديل الشفرة إلى إصلاحها في المشراح. تعامل مع الخطوات الموضحة أدناه باعتبارها السطر الأول لاستكشاف الأخطاء وإصلاحها. 

من العادات الجيدة التأكد من الكتلة والسكين والحمام قبل لمس عجلة التغذية. إن المختبرات التي تعمل على توحيد هذا الروتين الروتيني قبل الرحلة تبلغ عن عدد أقل بكثير من الكتل المدمرة، كما أن الوقت المستغرق في التحقق يؤتي ثماره على كل قسم لا يلزم إعادة قصه. 

• تثبيت: يجب تثبيت الأنسجة لفترة كافية وفي الكاشف المناسب، وإلا فإنها ستبقى طرية وممزقة. 
• يعالج: يجب أن تجفف الكحوليات والمقاصة المتدرجة بالكامل وتتسلل، أو تنضغط الأجزاء وتتفتت. 
• التضمين: يجب أن يكون البارافين خاليًا من الفقاعات ويحيط بالأنسجة بالكامل، مع توجيه الوجه للقطع الذي تحتاجه. 
• تشذيب الكتلة: اكشف وجهًا نظيفًا ومربعًا وأزل البارافين الخشن حتى لا تتلوث الأجزاء الأولى. 

المشكلة 1: تمزيق المقاطع أو خدشها أو سحبها

المقاطع الممزقة أو المسجلة هي العلامة الكلاسيكية على وجود أنسجة مقاومة للحافة الباهتة أو المتسخة. يقوم النصل بعمل لا يمكنه القيام به بشكل نظيف، والنتيجة هي جزء يتمزق على طول الألياف أو يحمل خدوشًا طولية. 

• سكين مملة أو متكسرة: تقدم إلى قطعة شفرة جديدة أو استبدل الشفرة؛ حتى نك صغير يسجل كل قسم. 
• زاوية التخليص خاطئة: قم بزيادة زاوية الخلوص قليلاً بحيث تقطع الحافة بدلاً من كشط وجه الكتلة. 
• الأنسجة الصلبة أو غير المعالجة: إعادة المعالجة أو إعادة التضمين؛ تحتاج المناطق الشبيهة بالكالسيوم أو العظام إلى إزالة الكلس قبل القطع. 
• الحطام على الحافة: يمسح بالسكين ويحجب الوجه؛ نشارة الشمع المتبقية على الحافة اسحب الشريط وتمزيقه. 

المشكلة 2: تجعد المقاطع أو طيها أو ضغطها

عادةً ما تعني المقاطع المتجعدة والمطوية أن الشريط لا يسترخي لأنه يترك الشفرة. البارافين دافئ جدًا، أو الحمام المائي ساخن جدًا، أو أن الجزء أكثر سمكًا مما يمكن للكتلة أن تتحرر بشكل نظيف. يظهر الضغط أيضًا عندما تكون زاوية السكين شديدة الانحدار. 

• حمام مائي ساخن جدًا: قم بخفضه إلى أعلى بقليل من نقطة انصهار البارافين (غالبًا 40 إلى 45 درجة مئوية) بحيث تتسطح الأجزاء دون ذوبان. 
• القسم سميك جدًا بالنسبة للأنسجة: تقليل سمك خطوة. يتم ضغط الكتل الناعمة جدًا في إعدادات أكبر. 
• زاوية الخلوص صغيرة جدًا: افتح الزاوية قليلاً حتى يرتفع القسم بدلاً من التدحرج. 
• كتلة دافئة جدا: دع الكتلة تبرد، أو قطعها في غرفة أكثر برودة؛ يطوى البارافين الدافئ لحظة إطلاقه. 

المشكلة 3: يختلف السمك بين القطع

عندما يكون حجم أحد الأقسام 4 ميكرومتر، والآخر 6 ميكرومتر، فإن الأداة أو الكتلة تتحرك بين الضربات. يفسد السماكة المتغيرة قياس الشكل ويسبب بقعًا غير متساوية، لذلك يجب تثبيته عند المصدر بدلاً من تجاهله. 

• المشبك عينة فضفاضة: تشديد تشاك والتحقق من أن الكتلة جالسة بشكل مربع ؛ أي مسرحية تغير التغذية الفعالة. 
• آلية التغذية البالية: تحقق من التغذية المعايرة وقم بصيانتها إذا انحرف الإعداد المبلغ عنه عن القطع. 
• قوة عقارب غير متناسقة: أدر العجلة بسلاسة وبشكل كامل؛ السكتات الدماغية الجزئية أو المتشنجة تتخطى التقدم. 
• اهتزاز أو مقعد غير مستقر: ضع المشراح على سطح صلب وعزله عن الهزازات أو أجهزة الطرد المركزي المجاورة. 

المشكلة 4: علامات الثرثرة والشريط غير المستوي

تبدو الثرثرة وكأنها نطاقات أفقية دقيقة عبر القسم. إنها مشكلة رنين أو استقرار: تهتز الكتلة أو الشفرة أو الأداة بأكملها أثناء مرور الحافة. نظرًا لأنه ميكانيكي، فإن الإصلاح يتعلق دائمًا تقريبًا بالثبات والحدة، وليس بالسمك. 

• الكتلة غير مدعومة بقوة: يتم إعادة تثبيتها أو إعادة تثبيتها بحيث لا يكون للنسيج وجه حر يمكن أن ينثني أثناء القطع. 
• حامل سكين فضفاض: تشديد حامل الشفرة ولوحة الدعم؛ رقائق ومحادثات ذات حافة متغيرة. 
• حافة مملة: الانتقال إلى شريحة جديدة. تهتز الحافة الباهتة عبر الأنسجة الصلبة. 
• القطع سريع جدًا: إبطاء السكتة الدماغية والحفاظ على الضغط حتى؛ التسرع يثير الثرثرة. 

المشكلة 5: لا توجد أقسام أو أقسام تلتصق بالشفرة

في بعض الأحيان تدور العجلة ولا يخرج أي شيء من الكتلة، أو تلتصق الأجزاء بالسكين بدلاً من تشكيل شريط. عادةً ما تكون هذه مشكلة في الإعداد أو البيئة وليست مشكلة في جهاز معطل، ويتم حلها سريعًا بمجرد معرفة المشتبه بهم المعتادين. 

• الخلاصة غير متفاعلة: تأكد من ضبط قرص السمك وتحرير التقدم؛ تغذية صفرية أو مقفلة تقطع الهواء. 
• لوحة مضادة للالتفاف خاطئة: ضبطه أو سحبه؛ لوحة موضوعة على الحافة تمنع القسم من الرفع. 
• الظروف الساكنة أو الجافة: قم برفع الرطوبة قليلاً أو استخدم خطوة مضادة للكهرباء الساكنة حتى يتم تحرير الأجزاء من الشفرة. 
• الشفرة مرتفعة جدًا أو منخفضة جدًا: أعد وضع السكين بحيث تلتقي حافة القطع مع وجه الكتلة عند الارتفاع الصحيح. 

قائمة مرجعية للتقسيم المسبق يمكنك تكرارها

رحلة مسبقة قصيرة ومتكررة تمنع معظم المشاكل المذكورة أعلاه. قم بتشغيله بنفس الطريقة في كل جلسة، بحيث يصبح استكشاف الأخطاء وإصلاحها بمثابة منع. 

• فحص: تحقق من وجه الكتلة وقطعة الشفرة والمشابك قبل القطع الأول. 
• تعيين: تأكد من السُمك وزاوية الخلوص ودرجة حرارة حمام الماء. 
• امتحان: قطع قسم واحد وعرضه تحت أ مجهر قبل تشغيل الدفعة. 
• سِجِلّ: لاحظ الإعدادات لكل كتلة حتى تكون النتيجة الجيدة قابلة للتكرار. 
• ينظف: امسحي الشفرة والحمام، وخزني الشفرات بأمان في مكان آمن خزانة السلامة الحيوية منطقة. 

الأداة التي تناسب الروتين

يزيل المشراح الذي يمكن الاعتماد عليه التخمين من القطع نفسه، ويترك لك التركيز على التحضير والتفسير. بالنسبة للفرق التي تقارن الأجهزة، قم بإقران الميكروتوم مع جهاز مُعاير التوازن التحليلي  وثابت جهاز طرد مركزي يحافظ المقعد على اتساق سير عمل الأنسجة بأكمله. 

⭐ المشراح الدوار الموصى به | وينكوم MCT-202 

وينكوم MCT-202 

تم وضع جهاز Wincom's Rotary Microtome MCT-202 في مختبرات علم الأنسجة وعلم الأمراض والأبحاث التي تقوم بإعداد أقسام الأنسجة المضمنة بالبرافين، مع نطاق ضبط سمك القسم من 1 إلى 25 ميكرومتر، وإعداد أدنى يبلغ 1 ميكرومتر، والحد الأقصى لحجم العينة 40 × 30 ملم، وخطأ في الدقة ضمن زائد أو ناقص 5 بالمائة. تمنح العجلة اليدوية الدوارة المشغل تحكمًا دقيقًا ومتكررًا في كل قطعة، بينما يحافظ البناء الصلب على تناسق الأقسام عبر كتلة كاملة. وهذا يجعله مناسبًا لتدريس المختبرات وعلم الأنسجة التشخيصية وسير عمل علم الأمراض الروتيني الذي يحتاج إلى تقسيم يمكن الاعتماد عليه ومنخفض التباين دون منحنى تعليمي حاد. 

عرض مشراح دوار Wincom MCT-202 

معدات داعمة تحمي جودة القسم

التقسيم لا يحدث بمعزل عن الآخر. تحدد الأدوات الموجودة حول الميكروتوم ما إذا كان القطع الجيد سيصبح شريحة جيدة أم لا، لذا فهي تستحق نفس الاهتمام الذي تحظى به الآلة نفسها. 

• المشاهدة:  a مجهر على مقاعد البدلاء للتحقق من كل قسم أول قبل التشغيل. 
• التسطيح:  a حمام مائي ضعه فوق ذوبان البارافين مباشرةً لتهدئة الأشرطة. 
• تصاعد: شرائح المجهر و غطاء زجاجي مطابقة لروتين تلطيخ الخاص بك. 
• يعالج: ان الحاضنة أو الفرن و الأوتوكلاف للتضمين وأدوات المختبرات النظيفة والقابلة لإعادة الاستخدام. 
• تعلُّم: ملكنا مدونة وأدلة مثل دور المجاهر في التشخيص و خمسة أنواع من المجهر يجب معرفتها.

الأسئلة الشائعة